Prøveforberedelse ogLaster
På grunn av bruk av et kontinuerlig buffersystem uten stablegel i de fleste tilfeller, bør prøvene ha en passende konsentrasjon og et lite volum. Bruk enpipetteå sakte tilsette prøven, med 5-10 μg per brønn, for å unngå en betydelig reduksjon i oppløsning. Nårlasting av prøve, må strømforsyningen være slått av. Prøven bør inneholde et indikatorfargestoff (0,025 % bromfenolblått eller oransje) og sukrose (10-15 %) eller glyserol (5-10 %) for å øke densiteten, konsentrere prøven og forhindre diffusjon. Noen ganger kan imidlertid sukrose eller glyserol forårsake U-formede bånd i elektroforeseresultater, noe som kan unngås ved å bruke 2,5 % Ficoll (polyvinylpyrrolidon).
Elektroforese
Spenningen for elektroforese er 5-15 V/cm, generelt rundt 10 V/cm. For separering av store molekyler bør spenningen være lavere, vanligvis ikke over 5 V/cm.
Farging
Fluorescerende fargestoff etidiumbromid (EB) brukes ofte til farging for å observere DNA-bånd i agarosegel. EB kan settes inn mellom basepar av DNA-molekyler, noe som får EB til å binde seg til DNA. Absorpsjonen av 260 nm ultrafiolett lys av DNA overføres til EB, og den bundne EB sender ut fluorescens ved 590 nm i det rød-oransje området av det synlige lysspekteret. Farging av gelen i en 1 mmol/L MgSO4-løsning i 1 time kan redusere bakgrunnsfluorescens forårsaket av ubundet EB, noe som letter påvisningen av små mengder DNA.
EB-fargestoff har flere fordeler: det er enkelt å bruke, bryter ikke nukleinsyrer, har høy følsomhet og kan farge både DNA og RNA. EB kan tilsettes til prøven og spores ved hjelp av UV-absorpsjon når som helst. Etter farging kan EB fjernes ved ekstraksjon med n-butanol.
Imidlertid er EB-fargestoff et potent mutagen, og forholdsregler, som bruk av polyetylenhansker, bør tas under håndtering. Akridin oransje er også et ofte brukt fargestoff fordi det kan skille mellom enkelttrådede og dobbelttrådede nukleinsyrer (DNA, RNA). Den viser grønn fluorescens (530 nm) for dobbelttrådete nukleinsyrer og rød fluorescens (640 nm) for enkelttrådete nukleinsyrer. I tillegg kan andre fargestoffer som metylenblått, metylengrønt og kinolin B brukes til farging.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) har spesialisert seg på produksjon av elektroforeseinstrumenter i mer enn 50 år med vårt eget profesjonelle tekniske team og FoU-senter. Vi har pålitelig og komplett produksjonslinje fra design til inspeksjon, og lager, samt markedsstøtte. Våre hovedprodukter er elektroforesecelle (tank/kammer), elektroforesestrømforsyning, blå LED-transilluminator, UV-transilluminator, gelbilde- og analysesystem etc.
Vi ser nå etter partnere, både OEM elektroforesetank og distributører er velkommen.
Hvis du har en kjøpsplan for produktene våre, ikke nøl med å kontakte oss. Du kan sende oss melding på e-post[e-postbeskyttet]eller[e-postbeskyttet], eller vennligst ring oss på +86 15810650221 eller legg til Whatsapp +86 15810650221, eller Wechat: 15810650221.
Vennligst skann QR-koden for å legge til på Whatsapp eller WeChat.
Innleggstid: 20. desember 2023