Vanlige problemer med DNA-elektroforese

Gelelektroforese er en av de viktigste metodene som brukes i molekylærbiologi for analyse av DNA.Denne metoden innebærer migrering av fragmenter av DNA gjennom en gel, hvor de separeres basert på størrelse eller form.Men har du noen gang støtt på noen feil under elektroforeseeksperimentene dine, for eksempel utsmurte bånd på agarosegelen, eller ingen bånd på gelen?Hva kan være årsaken til disse feilene?

irriterende

Våre teknikere har oppsummert par feilsøking her for din referanse.

1. Smørt bånd på agarosegel

smøre bånd på gel

DNAet ble degradert.Unngå nukleasekontaminering.

● Elektroforesebufferen er ikke fersk.Etter gjentatt bruk av elektroforesebuffer reduseres ionestyrken, og pH-verdien øker, slik at bufferkapasiteten svekkes, noe som påvirker elektroforeseeffekten.Det anbefales å bytte ut elektroforesebufferen ofte.

● Feil elektroforeseforhold ble brukt.Ikke la spenningen overstige 20 V/cm, og hold en temperatur <30°C under elektroforese.For gigantisk DNA-trådelektroforese bør temperaturen være <15°C. Sjekk at elektroforesebufferen har nok bufferkapasitet.

● For mye DNA ble lastet på gelen.Reduser mengden DNA.

● For mye salt i DNA.Bruk etanolutfelling for å fjerne overflødig salter i avansert.

● DNA var forurenset med protein.Bruk fenolekstraksjoner for å fjerne protein i avansert.

● DNAet ble denaturert.Ikke varm opp før elektroforese.Fortynn DNA i buffer med 20 mM NaCl.

2. Anomalier DNA-båndmigrering

● Renaturering av COS-stedet til λHind III-fragmentet.Varm opp DNA i 5 minutter under 65 ° C før elektroforese, og avkjøl det deretter på isenhet i 5 minutter.

● Feil elektroforeseforhold ble brukt.Ikke la spenningen overstige 20 V/cm, og hold en temperatur <30°C under elektroforese.Sjekk at elektroforesebufferen har nok bufferkapasitet.

● DNAet ble denaturert.Ikke varm opp før elektroforese.Fortynn DNA i buffer med 20 mM NaCl.

3. Svake eller ingen DNA-bånd på agarosegel

svake DNA-bånd

● Det var utilstrekkelig mengde eller konsentrasjon av DNA lastet på gelen.Øk mengden DNA.Polyakrylamidgelelektroforese er litt mer følsom enn agaroseelektroforese, og prøvebelastningen kan reduseres på passende måte.

● DNAet ble degradert.Unngå nukleasekontaminering.

● DNA ble elektroforert av gelen.Elektrofores gelen i kortere tid, bruk en lavere spenning, eller bruk en høyere prosentandel gel.

● Feil W-lyskilde ble brukt for visualisering av etidiumbromid-farget DNA.Bruk kortbølgelengde (254 nm) W lys for større følsomhet.

4. DNA-bånd mangler

Det lille DNA-et ble elektroforert av gelen.Elektrofores gelen i kortere tid, bruk en lavere spenning, eller bruk en høyere prosentandel gel.

● Vanskelig å skille DNA-båndene til lignende molekyler.Øk elektroforesetiden, og kontroller konsentrasjonenav gelen for å sikre at riktig prosentandel gel skal brukes.

● DNAet ble denaturert.Ikke varm opp før elektroforese.Fortynn DNA i buffer med 20 mM NaCl.

● DNA-trådene er enorme, og konvensjonell gelelektroforese er ikke egnet.Analyser på pulsgelelektroforese.Hvilke andre problemer har du hatt med agarosegelelektroforese?Vi vil undersøke mer for guider i fremtiden.

Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) er et spesialisert selskap som fokuserer på elektroforese-relaterte produkter i Kina.Historien starter i 1970 da Kina ennå ikke hadde gått inn i reformen og åpningstiden.Gjennom mange års utvikling har Liuyi Bitotech sitt eget merke, som er kjent som Liuyi Brand i hjemmemarkedet for elektroforeseprodukter.

Liuyi-merket har mer enn en 50-årig historie i Kina, og selskapet kan tilby stabile og høykvalitetsprodukter over hele verden.Gjennom mange års utvikling, er det verdig ditt valg!

De horisontale elektroforesecellene (tankene/kamrene) til Liuyi Biotech er av høy kvalitet med godt utseende.Med ulike størrelser på gelbrett kan de oppfylle dine forskjellige eksperimentelle krav.Vi har vårt eget tekniske team og fabrikk.Fra design til produksjon, råvarene til nøkkeldelene, vi kan kontrollere hele prosessen.DYCP 31-serien er for DNA-elektroforese, som er modellDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, ogDYCP-31E.Forskjellene mellom dem er gelstørrelser og pris.Vi leverer produkter i full størrelse til våre kunder.ModellenDYCP-32Ckan lage den største gelen 250mm*250mm.

1-1

I mellomtiden anbefaler vi vår elektroforesestrømforsyningDYY-6C,DYY-6DogDYY-10Cfor våre elektroforeseceller (tanker/kamre) DYCP-31 og 32-serien.

1-4

Hvis du ønsker mer informasjon om produktene, vennligst besøk denne nettsiden for å få mer, og velkommen til å kontakte oss via e-post for å fortelle oss hva du ønsker, og se om vi kan tilby løsningene for deg.

For mer informasjon om oss, vennligst kontakt oss på e-post[email protected], [email protected]


Innleggstid: mai-09-2022